روش اسپکتروفتومتری
روش اسپکتروفتومتری روشی کمی برای تعیین غلظت مولکول ها در یک محلول می باشد. در روش اسپکتروفتومتری ترکیب ماده با جذب نور مستقیما ارتباط داشته است .همچنین می توان از آن برای نظارت بر پیشرفت واکنش های آنزیمی بر اساس تغییر در جذب استفاده کرد.
روش اسپکتروفتومتری برای اهداف کنترل کیفیت استفاده می شود .
اسپکتروفتومتری مختص بخش های فرابنفش و مرئی طیف الکترو مغناطیسی است.
فرآیند روش اسپکتروفتومتری
روش اسپکتروفتومتری یک منبع نور و تک رنگ پرتو نوری تولید می کند .این پرتوی نور دارای طول موج کنترل شده می باشد و از نمونه درون یک ظرف شفاف عبور می کند . دستگاه اسپکتروفتومتری طول موج های خاصی از نور را بسته به خواص شیمیایی وفیزیکی آن جذب می کند.دستگاه اسپکتروفومتری الباقی طول موج ها را ارسال یا منعکس می کند. .intechopen.com/chapters/79874
مزایای روش اسپکتروفتومتری چیست؟
اسپکتروفتومتری یک تکنیک ساده است .که نتایج دقیقی را در طیف گسترده ای از انواع نمونه ارائه می دهد . روش اسپکتروفتومتری را می توان سریع آزمایش کرد، و تجزیه و تحلیل آن عموما غیر مخرب است.
محدودیت روش اسپکتروفتومتری چیست؟
محدودیت روش اسپکتروفتومتری شامل حساسیت و گزینش پذیری نسبتا کم است. بنابراین ممکن است تشخیص غلظت های بسیار کم دشوار باشد.
http://alliedacademies.org/articles/advancements-in-spectrophotometry-techniques-enhancing
روش انجام اسپکتروفتومتری
جهت سنجش میزان فسفر ابتدا اقدام به ساخت محلول های استاندارد پتاسیم دی هیدروژن طبق روش زیر مینماییم.
ما یک استاندارد 1000 PPM فسفر از پتاسیم دی هیدروژن فسفات میسازیم. همچنین 4.394 گرم از این ماده را وزن می کنیم و در بالن با حجم 1000 CC می ریزیم و با آب مقطر به حجم میرسانیم. ما باید نمونه را کاملا همگن سازیم و سپس از این محلول استاندارد هایی با غلظت کمتر 20و30و40و50 پی پی درست میکنیم.
یک گرم نمونه پودر آتش نشانی بر پایه منو فسفات را با دقت سه رقم اندازه گیری می کنیم. و در بالن 500 cc می ریزیم و به حجم 500 cc با آب مقطر میرسانیم .سپس دو الی سه ساعت به نمونه استراحت میدهیم تا نمونه داخل آب کاملا حل شود.(با توجه به اینکه پودر آتش نشانی حاوی مواد ضد رطوبت میباشد لذا برای انحلال پذیری بهتر دمای آب باید 50 درجه و بالاتر باشد).
بدلیل حجم بالای فسفر در نمونه به یک رقیق سازی دوم هم نیاز هست .از این محلول مجددا یک نمونه 5 به 100 هم رقیق سازی میکنیم.
شناساگر وانادات-مولیبدات
محلول شماره یک :
25 گرم مولیبدات آمونیوم را در 300میلی لیتر آب مقطر حل کنید.(NH4}6Movo2،4H2o)
محلول شماره دو:
1.25 گرم متاوانادات آمونیوم در 300میلی لیتر آب مقطر حل کنید.سپس آن را سرد کرده و 330 میلی لیتر اسیدکلریدریک غلیظ به آن بیفزاید.سپس محلول دو را به دمای اتاق رسانده ومحلول یک را به آن بیفزاید سپس خوب مخلوط کرده و در نهایت حجم را به یک لیتر برسانید.
مرحله نهایی روش اسپکتروفتومتری
این مرحله از روش اسپکتروفتومتری شش عدد ظرف تهیه میکنیم .داخل ظرف اول 20 cc آب مقطر می ریزیم. داخل ظرف دوم 20 سی سی از نمونه رقیق تر(5 به 100) وداخل ظرف سوم تا ششم هر کدام به ترتیب 20 سی سی از محلول های استاندارد 20و30و40و50 میریزیم.وبه هر کدام از شش ظرف 20سی سی شناساگر اضافه میکنیم. سپس نیم ساعت تا چهل وپنج دقیقه در فضای آزمایشگاه قرار میدهیم. صبر می کنیم تا واکنش کامل انجام شود و رنگ کامل شود.
ظرف حاوی آب مقطر و استاندارها را داخل دستگاه اسپکتروفتومتر قرار می دهیم . سپس جذب را در طول موج 420نانومتر قرائت میکنیم.
جذب های خوانده شده را در نرم افزار اکسل وارد می کنیم . نمودار کالیبراسیون را ترسیم میکنیم و سپس عدد جذب نمونه را از دستگاه قرائت می کنیم و داخل این معادله خط قرار میدهیم و عدد به دست آمده را در رقیق سازی ضرب میکنیم تا غلظت فسفر داخل نمونه بدست آید.
در پایان با ضرب عدد 115(وزن منوفسفات) و تقسیم بر 31(وزن فسفر) غلظت منوفسفات آمونیوم بدست می آید که میتوان خلوص را محاسبه کرد.
